iTRAQ实验技术服务

辉骏生物在液相途径的蛋白质组学方面具有强大的实力和丰富的经验，已为各地科研单位提供数十例iTRAQ技术服务。

一、iTRAQ概述
        iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation，iTRAQ）定量分析蛋白质的基本原理是利用iTRAQ试剂是可与氨基酸末端氨基及赖氨酸侧链氨基连接而标记上肽段,经过色谱分离，一级质谱和二级质谱分析，在质谱图中，被标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中，信号离子表现为不同质荷比(114～121)的峰，因此根据波峰的高度及面积，可以鉴定出蛋白质和分析出同一蛋白质不同处理的定量信息。
 
二、iTRAQ试剂结构

图1：iTRAQ试剂包括三部分：报告部分、肽反应部分、平衡部分。1、报告部分有八种：114-121，因此iTRAQ试剂可同时标记8组样品。2、肽反应部分：能与肽N端及赖氨酸侧链氨基发生共价连接而标记上肽段。3、平衡部分：保证被标记的同一肽段的质荷比相同。
 
三、与传统双向电泳定量分析相比，iTRAQ具有以下技术优势
    1、灵敏度高，检测限低，可检测出低丰度蛋白；
    2、分离能力强,分析范围广,iTRAQ可以对任何类型的蛋白质进行鉴定，包括高分子量蛋白质、酸性蛋白和碱性蛋白，膜蛋白和不溶性蛋白；
   3、 高通量：同时对8个样本进行分析，提高了实验通量，可同时对多个时间点或不同处理的蛋白质进行分析；  
   4、结果可靠：定性与定量分析结果更加可靠；
   5、自动化程度高：液相与质谱连用，自动化操作，分析速度快，分离效果好。
 
  
四、iTRAQ技术服务流程


                                                                 图2：iTRAQ技术流程。
五、iTRAQ技术服务内容
   1、样本制备与定量；iTRAQ试剂标记；
   2、液相分离和质谱分析；数据库检索；
   3、蛋白质定量分析；
   4、相关生物信息分析；
   5、实验报告提交。
 
六、送样须知
   1、技术咨询：在您开始实验之前，本公司将为您竭诚提供较有效的iTRAQ实验设计方案；
   2、为了保证iTRAQ实验能顺利进行，样品寄送需满足以下要求：
        基本要求：iTRAQ试剂可以标记任何类型的样本，如组织、细胞、细菌等材料。因此本公司接受任何类型的样本，对于不同的样本需要的量有所不同，具体需要量请咨询本公司。
       运输要求：液氮或干冰保存寄送，广州本地客户可上门收样。
       注：样本应避免各类污染和反复冻融。
 
七、iTRAQ实验报告内容
   1、蛋白定鉴定和定量分析结果；
   2、顾客*蛋白质对应的质谱峰图；
   3、实验完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。
 
八、iTRAQ实验服务案例

 

图3：iTRAQ定量分析结果。蛋白质样品经过四种iTRAQ（114-117）试剂标记后，质谱分析，每一质谱峰面积代表同一蛋白质不同处理的表达丰度。
 


九、服务周期及收费标准：欢迎登陆 http://*/   服务热线 400-699-1663
 
十、服务质量承诺
   1、本公司将为您提供严谨的iTRAQ实验设计方案
   2、提供客观的iTRAQ实验分析结果。