简介:该技术由传统双向电泳发展而来,其分离蛋白的原理与传统双向电泳相同。只是DIGE引入了三种荧光染料(Cy2, Cy3和Cy5)来分别标记不同组别的蛋白,以实现不同组别的蛋白在一张凝胶上完成电泳,胶图经不同波长的激光扫描,即可得到三个组别样品蛋白在同一张凝胶中的二维蛋白斑点图(图式蛋白表达谱)。蛋白质的定量和定性分析也是通过斑点大小分析及质谱鉴定来实现。
应用:动植物发育分化机理、抗协迫机制、疾病发病机理及生物标记物筛选研究等领域。
优势:1.灵敏度更高,可检测低至125pg的蛋白质;
2.高效,三个样本蛋白在一张凝胶上进行分离,操作误差小;
3.引入内标*了凝胶间的实验误差,结果精确,可重复性好;
4.ImageMaster7.0软件自动分析结果,降低人为分析偏差。
不同类型生物样本的DIGE结果
A:寄生虫,B:植物根,C:植物花柱,D:大鼠肝脏组织,E:细胞膜蛋白,F:羊皮肤细胞
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