一、技术简介
miRNA抑制载体导入细胞后可以表达产生特异性抑制靶miRNA的小分子片段。该片段与靶miRNA互补形成稳定的复合物,从而阻止了miRNA对靶mRNA的降解或者翻译抑制,上调了miRNA靶基因的表达。
采用载体方法抑制内源性miRNA的方法主要有2种,一是shRNA抑制法,采用U6或H1等POL III启动子驱动表达抑制miRNA的shRNA片段,二是采用串联的多个miRNA互补序列形成吸附“海绵”,从而高效的抑制miRNA。
图 miRNA抑制慢病毒载体构建
二、技术优势
1、 用途广泛,既可被包装产生miRNA抑制慢病毒,又可以质粒形式直接转染细胞而发挥对miRNA的抑制作用
2、 ShRNA抑制法可以直接合成抑制miRNA的片段,设计和构建简单、方便;
3、 海绵体法可以更高效的抑制靶miRNA,并且可以实现组织特异性抑制。
三、服务内容
1、 合成针对靶miRNA的shRNA或设计好的海绵体序列;
2、 目的序列与慢病毒载体的连接;
3、 连接产物的转化;
4、 测序验证;
5、 实验报告和原始结果提交。
四、服务须知
服务项目 客户提供 交付产物 实验周期
miRNA抑制慢病毒载体构建(shRNA法) 要抑制的miRNA序列 1、miRNA抑制慢病毒载体
2、载体图谱、测序结果 2-3周
miRNA抑制慢病毒载体构建(海绵体法) 设计好的海绵体或要抑制的miRNA序列 1、miRNA抑制慢病毒载体
2、载体图谱、测序结果 3-4周
五、实验周期及实验费用:详情请咨询我司客服人员http://fitgene.cn.b2b168.com
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