企业信息

    广州辉骏生物科技股份有限公司

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  • 公司认证: 营业执照已认证
  • 企业性质:股份有限公司
    成立时间:2008
  • 公司地址: 广东省 广州市 广州市黄埔区科学城揽月路3号国际企业孵化器D506
  • 姓名: 刘郁林
  • 认证: 手机已认证 身份证未认证 微信已绑定

    供应分类

    Pull down实验技术服务

  • 所属行业:农化 农药 生物农药
  • 发布日期:2023-02-12
  • 阅读量:313
  • 价格:面议
  • 产品规格:不限
  • 产品数量:999.00 套
  • 包装说明:不限
  • 发货地址:广东广州  
  • 关键词:辉骏生物,FITGENE,pull,down,蛋白互作,质谱鉴定,silac

    Pull down实验技术服务详细内容

    一.Pull down 的概念
    
           在Pull down实验中,带标签的诱饵蛋白能被特异结合该标签的固相亲和配基捕获,形成“次级亲和支持物”,用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。纯化产物洗脱后,经Western blot验证或LC-MS/MS,即可证明或鉴定与诱饵蛋白互作的蛋白。
    
    二.Pull down实验流程
    
                                                                              图1. Pull down流程示意图
    
    三.Pull down实验方案设计
    1、构建含His或GST标签的诱饵蛋白原核表达载体;
    2、原核表达诱饵蛋白(我们采用自诱导培养基培养细菌,能有效降低包涵体的形成);
    3、细菌裂解液过柱,带标签的诱饵蛋白被固相化亲和配基捕获,产生“次级亲和支持物”;
    4、待测样品裂解液过柱孵育,与诱饵蛋白互作的蛋白被“次级亲和支持物”吸附;
    5、清洗,离心,去除未结合的杂蛋白;
    6、洗脱,得到诱饵蛋白及其互作蛋白的复合物;
    7、如要验证某蛋白X与诱饵蛋白互作,则将6.所得的蛋白复合物与X蛋白的抗体孵育,做Western blot验证即可;
    8、如要寻找诱饵蛋白可能的互作蛋白,则需将6.所得的蛋白复合物做LC-MS/MS鉴定;
    
    图2. Pull down实验流程图
    
    
    四.生物信息学分析
    GO注释统计
    GO注释统计
    
     
    Pathway分析Pathway分析
     
                                                       
     
    Pathway分析
    
    
    五.Pull down实验技术服务内容
    1、原核表达载体构建;
    2、融合蛋白的诱导表达与纯化;
    3、pull down捕获互作蛋白;
    4、Western blot验证或LC-MS/MS鉴定互作蛋白;
    5、数据检索、生物信息学分析;
    6、结果分析与报告整理。
     
    六.订购pull down技术服务须知
            为保证pull down实验顺利进行,请告知您的研究背景和目的,并提供目的蛋白对应的mRNA序列或对应基因的NCBI登录号,及拟用的融合标签。
     
    七.实验周期及费用:咨询本公司。
    

    http://fitgene.cn.b2b168.com
    欢迎来到广州辉骏生物科技股份有限公司网站, 具体地址是广东省广州市广州市黄埔区科学城揽月路3号国际企业孵化器D506,联系人是刘郁林。 主要经营DIGE/SILAC/iTRAQ/双向电泳/质谱鉴定/  逆转录病毒包装/慢病毒shRNA干扰技术/miRNA慢病毒包装技术/载体构建与改造技术服务/腺病毒包装、载体构建/慢病毒包装、载体构建/Fitvirus慢病毒包装试剂盒/细胞感染转染实验/构建稳定细胞株技术服务/慢病毒过表达cDNA技术服务/无内毒素质粒抽提/cDNA克隆、基因调取服务。 单位注册资金单位注册资金人民币 100 万元以下。 作为一家从事教育装备多年的企业,主营质谱鉴定/蛋白组质学等产品,不论是什么样的客户我们都会以真诚的态度,优惠的价格,可靠地品质及热忱的服务来面对您。而且大量的库存以及合作的物流公司,确保您的货物能准确*的到达您的手中。一切为成为您可靠的伙伴而努力!