一、慢病毒包装概述: 慢病毒(Lentivirus)载体是以人类*缺陷型病毒(HIV)为基础发展起来的基因**载体,能同时感染分裂分裂细胞和非分裂细胞,并且可以整合到细胞基因组中高效表达,慢病毒中的毒性基因已经被剔除并被外源性目的基因所取代,属于假型病毒。 慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。将外源基因克隆进入表达载体,同时与包装质粒(表达病毒包装所需辅助蛋白)一起转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,收取培养基离心后可直接用于感染宿主细胞,当目的基因进入细胞后被整合到宿主基因组,从而高效表达目的基因。 二、慢病毒转染具有以下特点: 1.外源基因表达水平较高、表达稳定; 2.转染效率高,可感染分裂和不分裂的细胞,几乎可以感染所有类型的细胞,特别适合质粒载体转染效率低的细胞; 3.慢病毒基因*操作,易于制备大量病毒且滴度高; 4.病毒基因组可整合到细胞基因组,易于构建稳定细胞株。 三、慢病毒包装服务内容: 1.客户提供插入片段信息;如序列、NCBI登录号等; 2.将目的片段克隆到慢病毒表达载体上; 3.慢病毒包装、扩增、滴度的测定; 4.实验报告提交。 四、客户提供: 1.客户提供慢病毒包装的实验方案; 2.若客户只提供组织、细胞等样本,还需提供目的基因NCBI登录号,本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用; 3.对于本公司已有的载体和模版,免费提供。 五、实验报告内容: 1.含目的片段的慢病毒一份,可直接用于转染; 2.引物序列、载体图谱、测序结果各一份; 3.慢病毒包装实验所需试剂耗材、仪器设备、实验方法各一份。